本站讯(叶升课题组供稿)肽-主要组织相容性复合物(pMHC)多聚体被广泛认为是检测、表征和分离抗原特异性CD8+T细胞亚群的首选技术。这些多聚体在通过流式细胞术和荧光显微镜等单细胞分析技术研究感染、自身免疫状况和癌症方面有显著优势。
2024年7月9日,天津大学生命科学学院叶升、刘斯团队在《International Journal of Biological Macromolecules》期刊(中科院1区)上在线发表了Preparation Empty Peptide-Receptive MHC Class I Complex for Large-Scale Detection through Photolabile Peptide Ligands的研究论文,该论文介绍了一种利用二硫键稳定分子和光解肽配体制备空载MHC-I类四聚体的经济且简便的方法。
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在这项研究中,研究团队通过引入了一对二硫键来稳定MHC分子,该分子通过光解肽配体辅助的体外折叠方法纯化,在紫外线照射下,这些单体能够在链霉亲和素上成功组装成带荧光标记的空四聚体。从而使其能接受抗原肽。通过简单的一步肽加载反应,这种空载MHC分子能够形成pMHC,实现高通量的pMHC生成。通过这种方法生成的pMHC四聚体可与商用pMHC四聚体分子相媲美。本研究设计提供了一种用户友好的工作流程,可无缝整合商业化试剂盒,便于大规模研究TCR特异性。该空肽MHC-I类复合物试剂盒将为发现表位和监测对潜在抗原肽的免疫反应提供快速且方便的工具。
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天津大学生命科学学院博士生张梦宇、王向尧,锦州医学院硕士生吴俊杰为本文的共同第一作者,天津大学生命科学学院叶升教授、刘斯副教授、中国人民解放军总医院赵之明主任医师为本文的共同通讯作者,天津大学生命科学学院为本文第一单位。该工作得到了国家自然科学基金,科技部重点研发计划,中国科协青年托举人才项目等支持。
原文链接:https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.133781
(编辑 焦德芳 潘艳秋)